Testes Ergométricos em Pacientes com Anemia Falciforme: Segurança, Viabilidade e Possíveis Implicações no Prognóstico / Exercise Testing In Patients with Sickle Cell Disease: Safety, Feasibility and Potential Prognostic Implication

Resumo Fundamento Pacientes com anemia falciforme (AF) têm risco aumentado de complicações cardiovasculares. O teste ergométrico é usado como marcador de prognóstico em uma série de doenças cardiovasculares. Entretanto, há uma escassez de evidências sobre exercícios em pacientes com AF, especialmente em relação à sua segurança, viabilidade e possível função prognóstica. Objetivos Usamos o teste em esteira máximo para determinar a segurança e a viabilidade do teste ergométrico em pacientes com AF. Além disso, os fatores associados à duração do exercício, bem como o impacto das alterações causadas pelo exercício em resultados clínicos, também foram avaliados. Métodos 113 pacientes com AF que passaram pelo teste ergométrico e por uma avaliação cardiovascular abrangente incluindo um ecocardiograma e os níveis do peptídeo natriurético do tipo B (BNP). O desfecho de longo prazo foi uma combinação de eventos incluindo morte, crises álgicas graves, síndrome torácica aguda ou internações hospitalares por outras complicações associadas â doença falciforme. A análise de regressão de Cox foi realizada para identificar as variáveis associadas ao resultado. Um p valor <0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Resultados A média de idade foi de 36 ± 12 anos (intervalo, 18-65 anos), e 62 pacientes eram do sexo feminino (52%). A presença de alterações isquêmicas ao esforço e resposta pressórica anormal ao exercício foram detectadas em 17% e 9 % da´população estudada respectivamente. Dois pacientes apresentaram crise álgica com necessidade de internação hospitalar no período de 48 horas da realização do exame. Fatores associados à duração do exercício foram idade, sexo, velocidade máxima de regurgitação tricúspide (RT), e relação E/e', após a padronização quanto aos marcadores da gravidade da doença. Durante o período médio de acompanhamento de 10,1 meses (variando de 1,2 a 26), 27 pacientes (23%) apresentaram desfechos clínicos adversos. Preditores independentes de eventos adversos foram a concentração de hemoglobina, velocidade do fluxo transmitral tardio (onda A), e a resposta da PA ao exercício. Conclusões A realização de testes ergométricos em pacientes com AF, clinicamente estáveis, é viável. A duração do exercício estava associada à função diastólica e a pressão arterial pulmonar. A resposta anormal da PA foi um preditor independente de eventos adversos.

Abstract Background Patients with sickle cell disease (SCD) are at increased risk for cardiovascular complications. Exercise testing is used as a prognostic marker in a variety of cardiovascular diseases. However, there is a lack of evidence on exercise in SCD patients, particularly regarding its safety, feasibility, and possible prognostic role. Objectives We used the maximal treadmill test to determine safety and feasibility of the exercise testing in SCD patients. Additionally, the factors associated with exercise duration, as well as the impact of exercise-induced changes on clinical outcome, were also assessed. Methods One-hundred thirteen patients with SCD, who underwent exercise testing, were prospectively enrolled. A comprehensive cardiovascular evaluation, including echocardiography and B-type natriuretic peptide (BNP) levels, were obtained. The long-term outcome was a composite endpoint of death, severe acute painful episodes, acute chest syndrome, or hospitalization for other SCD-related complications. Cox regression analysis was performed to identify the variables associated with the outcome. A p-value<0.05 was considered to be statistically significant. Results The mean age was 36 ± 12 years (range, 18-65 years), and 62 patients were women (52%). Ischemic electrocardiogram and abnormal blood pressure (BP) response to exercise were detected in 17% and 9%, respectively. Two patients experienced pain crises within 48 hours that required hospitalization. Factors associated with exercise duration were age, sex, tricuspid regurgitation (TR) maximal velocity, and E/e' ratio, after adjustment for markers of disease severity. During the mean follow-up of 10.1 months (ranging from 1.2 to 26), the endpoint was reached in 27 patients (23%). Independent predictors of adverse events were hemoglobin concentration, late transmitral flow velocity (A wave), and BP response to exercise. Conclusions Exercise testing in SCD patients who were clinically stable is feasible. Exercise duration was associated with diastolic function and pulmonary artery pressure. Abnormal BP response was an independent predictor of adverse events.

Análise qualitativa do teste de fragilidade osmótica para amostras processadas a fresco ou após 24 horas de incubação a 37ºC / Qualitative analysis of the osmotic fragility test for samples processed fresh or after 24 hours of incubation at 37ºC

Objetivo: Analisar qualitativamente o teste de fragilidade osmótica (F.O.) para amostras a fresco ou após incubação a 37°C. Métodos: Foram processadas 20 amostras de sangue periférico, coletadas em duplicata com 5mL em cada tubo com heparina, de pacientes com solicitação de F.O. como exame de rotina para processamento a fresco e após incubação por 24 horas em banho-maria a 37°C, em 13 tubos com concentrações variáveis de 0,1% a 0,9% de NaCl. Resultados: Foram analisadas 20 amostras de pacientes em sua maioria do gênero feminino 17/20 (85%), com idades entre 3 meses a 75 anos, para realização do teste de F.O. A análise qualitativa dos resultados mostrou que 9/20 (45%) amostras tiveram resultado concordante entre os testes de F.O. para amostras a fresco e após incubação a 37°C. Dos resultados discordantes, 8/11 (72,7%) resultados mostram fragilidade dos eritrócitos à hemólise nas amostras a fresco e curva normal (sem hemólise) após incubação da amostra a 37°C. Outros 3/11 (22,3%) resultados apresentaram curva normal (sem hemólise) no teste com amostra à fresco e resistência à hemólise no teste com a amostra após incubação a 37°C. Com o teste de Extato de Fisher não mostrou diferença estatística (p=0,5743) para as amostras processadas a fresco ou após incubação a 37°C. Conclusão: O teste de F.O. se mostrou mais eficiente quando a amostra testada foi analisada após incubação por 24 horas a 37°C em banho-maria, contudo não houve diferença estatística para resultados processados a fresco ou após incubação a 37°C.

Objective: Qualitatively analyze the osmotic fragility test (O.F.) for samples fresh or after incubation at 37°C. Methods: Twenty peripheral blood samples were processed, collected in duplicate with 5 ml in each tube with heparin, from patients with O.F. request. as a routine examination for fresh processing and after incubation for 24 hours in a water bath at 37°C, in 13 tubes with varying concentrations of 0.1% to 0.9% NaCl. Results: Twenty samples of patients were analyzed, mostly female, 17/20 (85%), aged between 3 months to 75 years, for the O.F. test. The qualitative analysis of the results showed that only 9/20 (45%) samples had a consistent result between the F.O. tests for fresh samples and after incubation at 37°C. From the discordant results, 8/11 (72.7%) results show fragility of erythrocytes to hemolysis in fresh samples and normal curve (without hemolysis) after sample incubation at 37o C. Other 3/11 (22.3%) results showed normal curve (without hemolysis) in the test with fresh sample and resistance to hemolysis in the test with the sample after incubation at 37o C. With the Fisher Extact test showing no statistical difference (p=0.5743) for samples processed fresh or after incubation at 37°C. Conclusion: The O.F. proved to be more efficient when the tested sample was analyzed after incubation for 24h at 37°C in a water bath, however, there was no statistical difference for results processed fresh or after incubation at 37°C.

Proposta de escala colorimétrica para inspeção visual do grau de hemólise em bolsas de concentrado de hemácias / Colorimetric scale proposal for visual inspection of the hemolysis degree in red cells concentrate bags

Objetivo: Os concentrados de hemácias não estão livres de lesões de estoque, sendo a mais comum a lise das hemácias. Criar uma escala colorimétrica para inspeção visual do grau de hemólise de concentrados de hemácias. Métodos: Foram utilizadas 102 bolsas de concentrados de hemácias (n=36), concentrados de hemácias pobres em leucócitos (n=36) ou de concentrados de hemácias desleucotizadas (n=36), com até 28 dias da produção, em condições padrões de armazenamento e da rotina da Fundação Hemopa. Os valores de hemoglobina e hematócrito foram lidos em contador automatizado. O grau de hemólise foi realizado em amostras de 5 mL do segmento das bolsas, com leitura em espectrofotômetro. O teste de hemólise foi realizado com três gotas de amostras do segmento das bolsas, em tubo seco, adição de 4 mL de solução fisiológica, centrifugação e inspeção visual do sobrenadante (estudo duplo-cego). Para a confecção da escala colorimétrica foram utilizados os resultados de grau de hemólise e teste de hemólise (n=36) e registro fotográfico dos vários níveis de grau de hemólise das bolsas. Para a validação da escala colorimétrica foram realizados grau de hemólise e teste de hemólise para as bolsas restantes (n=66), e com os resultados comparados com a escala proposta (estudo duplo-cego). Resultados: Apenas 7,5% (5/66) das bolsas testadas foram negativas para o teste de hemólise clássico (visual), e positivas quando reavaliadas na escala colorimétrica proposta. Conclusão: A escala colorimétrica proposta mostrou-se simples e reproduzível para definição de teste de hemólise e o grau de hemólise para concentrados de hemácias.

Objective: Red blood cell (RBC) concentrates are not free of stock lesions, the most common of which is lysis of RBC. Create a colorimetric scale for visual inspection of the degree of hemolysis of bag red blood cells. Methods: Eighty-two bags of RBC concentrates (n = 36), RBC concentrates poor in leukocytes (n = 36) or RBC concentrates desleucotizadas (n = 36) were used with up to 28 days of production, under standard storage conditions of the Hemopa Foundation routine. Hemoglobin and hematocrit values were read in automated counter. The degree of hemolysis performed in 5ml samples from the bag segment, with spectrophotometer reading. The hemolysis test was performed with three drops of bag segment samples, in a dry tube, addition of 4 mL of physiological solution, centrifugation and visual inspection of the supernatant (double-blind study). To prepare the colorimetric scale used was the degree of hemolysis and hemolysis test results (n = 36) and photographic records of multiple levels of degree of hemolysis of bags. For the validation of the Colorimetric scale, hemolysis degree and hemolysis test were performed for the remaining bags (n = 66), and the results were compared with the proposed scale (double-blind study). Results: Only 7.5% (5/66) of the tested bags were negative for the classical (visual) hemolysis test, and positive when reevaluated on the proposed colorimetric scale. Conclusion: The proposed colorimetric scale was simple and reproducible for the definition of hemolysis test and the degree of hemolysis for RBC concentrates.

Recent trends of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency among saudi population in Riyadh city / Tendências recentes da deficiência de glicose-6-fosfato desidrogenase entre a população saudita na cidade de Riade

G6PD deficiency is associated with erythrocyte deficiency in the X-chromosome enzyme. It causes a hematologic syndrome called hemolytic anemia that connects G6PD deficiency with X-linked condition. In the Middle East, including Saudi Arabia, G6PD deficiency is the most dominant genetic blood disorders. It results in higher rates of mortality and morbidity due to its incurable long-lasting nature and prevalence of physical and psychological incapacities. In this study, an attempt was made to evaluate the prevalence of G6PD deficiency among the Saudi population in Riyadh city. A cross-sectional retrospective study was conducted at King Saud University Medical City in Riyadh, Saudi Arabia. The population of the study comprised randomly chosen males and females who visited the hospital from January 2017 to January 2018. Statistical analyses were performed using SPSS, and descriptive analysis was used to find the frequency of G6PD-deficient patients. Out of the 209 patients, 62.2% were males (n=130) and 37.8% were females (n=79). Twenty males and 6 females were found to have G6PD deficiency, with the male to female ratio being 1:3. Out of the total 130 male participants, 20 patients were found to be enzyme deficient and 6 patients of 79 female patients were found to be G6PD deficient. There were 38.4% (n=10) patients with G6PD level <4 units/gram hemoglobin, 26.9% (n=7) patients had G6PD levels of 4.1­7.0 units/gram hemoglobin, and 34.6% (n=9) patients had >7 units/gram hemoglobin. Among the G6PD patients, 23.07% patients were severely anemic, and 5 (19.2%) patients were reported to have high bilirubin. The present study revealed the G6PD prevalence to be 12.4% among the Saudi population; this value is significantly higher than that found in France, Spain, India, and Singapore. In the Saudi population, males are more vulnerable to G6PD-deficient than females. Hence, attention should be paid to G6PD-deficient patients while prescribing antimalarial medication. Such patients may be advised to avoid certain foods to minimize the risk of having hemolytic episodes.

A deficiência de G6PD está associada à deficiência de eritrócitos na enzima do cromossomo X. Causa uma síndrome hematológica chamada anemia hemolítica que conecta a deficiência de G6PD à condição ligada ao X. No Oriente Médio, incluindo a Arábia Saudita, a deficiência de G6PD é o distúrbio genético do sangue mais dominante. Isso resulta em maiores taxas de mortalidade e morbidade devido à sua natureza incurável e duradoura e à prevalência de incapacidades físicas e psicológicas. Neste estudo, foi feita uma tentativa de avaliar a prevalência de deficiência de G6PD entre a população saudita na cidade de Riade. Um estudo retrospectivo transversal foi realizado na cidade médica da Universidade King Saud, em Riade, na Arábia Saudita. A população do estudo compreendeu homens e mulheres escolhidos aleatoriamente que visitaram o hospital entre janeiro de 2017 e janeiro de 2018. As análises estatísticas foram realizadas com o SPSS e a análise descritiva foi utilizada para determinar a frequência de pacientes com deficiência de G6PD. Dos 209 pacientes, 62,2% eram do sexo masculino (n = 130) e 37,8% eram do sexo feminino (n = 79). Verificou-se que 20 homens e 6 mulheres apresentavam deficiência de G6PD, sendo a proporção homem/mulher de 1:3. Do total de 130 participantes do sexo masculino, 20 pacientes apresentaram deficiência de enzima e 6 de 79 pacientes do sexo feminino apresentaram deficiência de G6PD. Havia 38,4% (n = 10) pacientes com nível de G6PD < 4 unidades/grama de hemoglobina, 26,9% (n = 7) pacientes tinham níveis de G6PD de 4,1-7,0 unidades/grama de hemoglobina e 34,6% (n = 9) pacientes tinham > 7 unidades/grama de hemoglobina. Entre os pacientes com G6PD, 23,07% eram severamente anêmicos e cinco (19,2%) pacientes relataram ter alta bilirrubina. O presente estudo revelou que a prevalência de G6PD é de 12,4% na população saudita; esse valor é significativamente maior que o encontrado na França, Espanha, Índia e Cingapura. Na população saudita, os homens são mais vulneráveis à deficiência de G6PD do que as mulheres. Portanto, deve-se prestar atenção aos pacientes com deficiência de G6PD durante a prescrição de medicamentos antimaláricos. Esses pacientes podem ser aconselhados a evitar certos alimentos para minimizar o risco de episódios hemolíticos.

Marcadores de hemólise em concentrado de hemácias administrados por cateter central de inserção periférica não valvulado* / Marcadores de hemólisis en concentrado de eritrocitos administrados por catéter central de inserción periférica sin válvula* / Hemolysis markers of blood administered in non-valved peripherally inserted central catheter*

Resumo Objetivo: Identificar as variações nos níveis de marcadores de hemólise em CH administrados por CCIP segundo o calibre do cateter. Método: Estudo experimental realizado em laboratório com condições de temperatura e umidade controladas. A amostra teve 36 alíquotas de sangue de 10 bolsas de hemácias com tipo de sangue A+; infusão de gravidade foi utilizada em seis CCIP de 3Fr (French) e seis de 4Fr, totalizando 12 experimentos divididos em três tempos: basal, fluxo livre e fluxo controlado. Analisou-se grau de hemólise, valores totais e livres de hemoglobina, desidrogenase láctica e potássio. Resultados: Houve aumento da média de hemoglobina livre (p=0,01) e grau de hemólise (p=0,01) após infusão de fluxo livre, com média de elevação de 0,04 de potássio (p<0,01) e redução de hemoglobina total (p=0,01) em fluxo controlado. O concentrado de hemácias aplicadas em 4Fr CCIP teve média de elevação de grau de fluxo. O CCIP de 3Fr teve aumento médio significante em grau de hemólise (p=0,03) e hemoglobina livre (p=0,01) após controle do fluxo. Conclusão: O CCIP de 4Fr foram associados a maiores mudanças nos marcadores de hemólise. Maior dimensão do calibre pode proporcionar fluxo turbulento, contribuindo para um maior choque entre as hemácias.

Resumen Objetivo: Identificar las variaciones de los niveles de marcadores de hemólisis en CE administrados por CCIP según el calibre del catéter. Método: Estudio experimental realizado en laboratorio en condiciones de temperatura y humedad controladas. La muestra tenía 36 alícuotas de sangre de 10 bolsas de eritrocitos con tipo de sangre A+; fue utilizada infusión por gravedad en seis CCIP de 3 FR (French) y seis de 4 FR, un total de 12 experimentos divididos en tres tiempos: basal, flujo libre y flujo controlado. Se analizó el nivel de hemólisis, valores totales y libres de hemoglobina, deshidrogenasa láctica y potasio. Resultados: Hubo un aumento del promedio de hemoglobina libre (p=0,01) y nivel de hemólisis (p=0,01) después de infusión de flujo libre, con promedio de elevación de 0,04 de potasio (p<0,01) y reducción de hemoglobina total (p=0,01) en flujo controlado. El concentrado de eritrocitos aplicados en 4 FR CCIP tuvo promedio de elevación de nivel de flujo. El CCIP de 3 FR tuvo un aumento promedio significativo en nivel de hemólisis (p=0,03) y hemoglobina libre (p=0,01) después de control de flujo. Conclusión: El CCIP de 4 FR fue asociado a mayores cambios en los marcadores de hemólisis. Mayor dimensión del calibre puede proporcionar flujo turbulento, lo que contribuye a un mayor choque entre los eritrocitos.

Abstract Objective: To evaluate the change in hemolysis markers in packed red blood cells, administered by gravity infusion in non-valved PICC lines, according to different sizes. Methods: Experimental study carried out in laboratory under controlled conditions of temperature and humidity. The sample had 36 blood aliquots from 10 packed red blood cells bags with A positive blood type; gravity infusion was used in six 3 French (Fr) PICC and in six 4Fr PICC, totaling 12 experiments divided in three moments: Basal, Free Flow and Controlled Flow. Degree of hemolysis, total and free hemoglobin values, lactic dehydrogenase and potassium were analyzed. Results: There was an average increase of free hemoglobin (p=0.01) and degree of hemolysis (p=0.01) after Free Flow infusion, with 0.04 average elevation of potassium (p<0.01) and decrease of total hemoglobin (p=0.01) in Controlled Flow. The packed red blood cells infused in 4Fr PICC had average elevation of degree of hemolysis (p=0.03) in Free Flow, and potassium (p=0.03) and degree of hemolysis (p=0.05) in the Controlled Flow. The 3Fr PICC had significant average increase in the degree of hemolysis (p=0.03) and free hemoglobin (p=0.01) after flow control. Conclusion: The 4Fr PICC were associated to higher changes in hemolysis markers. We infer that the larger size can provide a turbulent flow, contributing to a larger clash among red blood cells.

Hematological, biochemical, and blood gas alterations of goat whole blood stored in CPDA-1 and CPD/SAG-M plastic bags / Avaliação dos parâmetros hematológicos, bioquímicos e hemogasométricos do sangue caprino armazenado em bolsas CPDA-1 e CPD/SAG-M

ABSTRACT: The aim of this study was to evaluate the hematological, biochemical, and blood gas alterations of goat whole blood stored in different blood bags. Seven male, adult, crossbreed goats were used, weighing 62±1.8 kg. Nine hundred milliliters of whole blood from each animal was collected and stored in blood bags (450 ml in each), CPDA-1 (citrate phosphate dextrose-adenine) and CPD/SAG-M (citrate phosphate dextrose with saline-glucose-mannitol) as additive solutions, and kept refrigerated (2-4 ºC) for 42 days. Blood samples were collected from the plastic bags at baseline (T0) and after seven, 14, 21,28, 35, and 42 days for hematological, biochemical, blood gas, and microbiological evaluations. Free hemoglobin, degree of hemolysis, lactate, and pO2were increased in both bags, whereas hydrogen potential (pH) and the total hemoglobin concentration decreased overtime(P<0.05). The red blood cell count, glucose, sodium, and potassium remained stable, compared to the baseline. The CPD/SAG-M bag presented a lower red cell count, globular volume, total hemoglobin, and sodium, and a higher degree of hemolysis and plasma hemoglobin, compared with the CPDA-1 bag. The whole goat blood remained viable for therapeutic use; although, there were some important changes in the variables of the 42-day stored blood in relation to fresh blood (T0). We concluded that the CPDA-1 bag is more suitable for use in the storage of goat blood because of its lower commercial value.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações hematológicas, bioquímicas e hemogasométricas do sangue total de caprinos armazenado em diferentes bolsas de sangue. Foram utilizados sete caprinos machos, adultos, sem raça definida, pesando 62±1,8kg. Coletou-se 900 mL de sangue total de cada animal, em duas bolsas plásticas tipos CPDA-1 (citrato-fosfato-dextrose-adenina) e CPD/SAG-M (citrato-fosfato-dextrose com solução aditiva de salina-glicose-manitol), armazenadas sob refrigeração (2-4 °C) durante 42 dias. Amostras de sangue foram coletadas das bolsas no início do estudo (T0) e depois de sete, 14, 21, 28, 35 e 42 dias, para realização de análises hematológicas, bioquímicas, hemogasométricas e microbiológicas. Nas duas bolsas houve aumento da concentração de hemoglobina plasmática, grau de hemólise, lactato, pO2 e redução de hemoglobina total e pH (p<0,05), porém não houve variação no número de hemácias, glicose, sódio e potássio quando comparado ao momento basal (T0). A bolsa CPD/SAG-M apresentou menor número de hemácias, volume globular, concentração de hemoglobina total e sódio, e maiores valores de grau de hemólise e hemoglobina plasmática em relação a bolsa CPDA-1 (P<0,05). Apesar de serem constatadas alterações em importantes variáveis do sangue caprino armazenado durante 42 dias em relação ao sangue fresco (T0), o sangue total caprino permaneceu viável para uso terapêutico. A análise comparativa entre os dois tipos de bolsa revelou uma similaridade de resultados para a grande maioria das variáveis estudadas, portanto a bolsa CPDA-1 pode ser considerada a mais indicada para uso na espécie caprina exclusivamente devido ao seu menor valor comercial.

Analysis of BCL11A gene polymorphisms and hemolysis parameters in patients with sickle-cell disease / Análise dos polimorfismos do gene BCL11A e parâmetros de hemólise em pacientes com anemia falciforme

ABSTRACT Introduction: Patients with sickle-cell disease (SCD) present chronic hemolysis with increased serum biomarkers. Genetic polymorphisms of the BLC11A gene modulate fetal hemoglobin (HbF), thus reducing hemolysis Objective: To associate the polymorphisms of BCL11A gene with the hemolysis markers: reticulocyte, bilirubin, uric acid, lactate dehydrogenase (LDH), and methemoglobin (MetHb) in SCD patients. Methods: The study included 45 patients with SCD of both sexes using hydroxyurea (HU), treated at a Hospital in Fortaleza, Ceará, Brazil, along with 80 healthy individuals as the control group. MetHb, uric acid, and bilirubin measurements were carried out with the spectrophotometric method, and LDH with a kinetic method, a reticulocyte count by a manual method; and evaluation of BCL11A polymorphisms, in real time polymerase chain reaction (PCR). Data were analyzed using the statistical software GraphPad Prism. The level of significance was set at < 5%. Results: In region rs7557939 of the BCL11A gene genotype, A/G showed a significant increase of MetHb (p = 0.0297), and the A/A genotype showed high concentration of LDH (p = 0.0316) in the same region. The use of HU at doses ≥ 10 mg/kg/day showed a decrease of LDH (p = 0.02), and treatment for > 50 months was linked to the reticulocyte count (p = 0.0155). Conclusion: Polymorphisms in the rs7557939 region of the BCL11A gene appear to somehow interfere in the clinical setting of patients with SCD, suggesting relation with the concentration of MetHb and LDH. This study pioneered an investigation into the association of hemolysis biomarkers with BCL11A gene polymorphisms in SCD.

RESUMO Introdução: Pacientes com anemia falciforme (AF) apresentam hemólise crônica com biomarcadores séricos aumentados. Os polimorfismos genéticos do gene BLC11A modulam a hemoglobina fetal (HbF), reduzindo, assim, a hemólise. Objetivo: Associar os polimorfismos do gene BCL11A aos marcadores de hemólise: reticulócitos, bilirrubina, ácido úrico, lactato desidrogenase (LDH) e meta-hemoglobina (MetHb) em pacientes com AF. Métodos: O estudo incluiu 45 pacientes com AF que utilizavam hidroxiureia (HU), tratados em um hospital de Fortaleza, Ceará, Brasil, e 80 indivíduos saudáveis como grupo-controle. A dosagem de MetHb, ácido úrico e bilirrubina foi realizada por método espectrofotométrico; LDH, pelo método cinético; contagem de reticulócitos, pelo método manual; e avaliação de polimorfismos BCL11A, por reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. Os dados foram analisados usando o software estatístico GraphPad Prism. O nível de significância foi < 5%. Resultados: Na região rs7557939 do gene BCL11A, o genótipo A/G mostrou aumento significativo de MetHb (p = 0,0297), e o genótipo A/A esteve relacionado com a alta concentração de LDH (p = 0,0316). Pacientes em uso de HU em doses ≥ 10 mg/kg/dia apresentaram diminuição de LDH (p = 0,02), e o tratamento por mais de 50 meses foi relacionado com a contagem de reticulócitos (p = 0,0155). Conclusão: Polimorfismos na região rs7557939 do gene BCL11A parecem interferir de alguma forma nas manifestações clínicas de pacientes com AF, o que sugere uma relação com a concentração de MetHb e LDH. Este estudo foi pioneiro na investigação da associação de biomarcadores de hemólise com polimorfismos do gene BCL11A na AF.

Hemolysis risk after packed red blood cells transfusion with infusion pumps / Risco de hemólise após transfusão de concentrado de hemácias com bombas de infusão / Riesgo de hemólisis después de la transfusión de concentrados de glóbulos rojos con bombas de infusión

ABSTRACT Objective: To evaluate the hemolysis biomarkers of packed red blood cells transfused by two different linear peristaltic infusion pumps at two infusion rates. Method: An experimental and randomized study was designed simulating the clinical practice of transfusion. Two linear peristaltic infusion pumps from different manufactures were studied in triplicate at 100 mL/h and 300mL/h infusion rates. The chosen hemolysis biomarkers were total hemoglobin, free hemoglobin, hematocrit, potassium and degree of hemolysis. They were analyzed before and after each infusion. Results: Potassium showed statistically significant variations in all scenarios of the experiment (P<0.010). In a separated analysis, potassium increased mainly at 300mL/h rate (P=0.021) and free hemoglobin had significant variation when comparing infusion pumps from different manufacturers (P=0.026). Although hematocrit, total hemoglobin and degree of hemolysis had increased after infusion, no statistically significance variations were identified. Conclusions: Hemolysis risk induced by a linear peristaltic infusion pump was identified by an increase in free hemoglobin and potassium markers. As the potassium biomarker is often increased in aged packed red blood cells, we do not recommend using them in this scenario. Additional studies should be performed about other markers and using larger samples in order to reinforce the transfusion practice in nursing.

RESUMO Objetivo: avaliar os biomarcadores de hemólise de concentrado de hemácias transfundidos por duas bombas de infusão peristáltica linear distintas, em duas taxas de infusão. Método: estudo experimental randomizado desenhado para simular a prática clínica da transfusão. Duas bombas de infusão peristáltica linear de diferentes fabricantes foram estudadas em triplicata a 100 ml/h e 300 mL/h de infusão. Os biomarcadores de hemólise escolhidos foram hemoglobina total, hemoglobina livre, hematócrito, potássio e grau de hemólise. Eles foram analisados antes e após cada infusão. Resultados: o potássio apresentou variações estatisticamente significativas em todos os cenários do experimento (P < 0,010). Em análise separada, o potássio aumentou principalmente na taxa de 300 mL/h (P = 0,021) e a hemoglobina livre teve uma variação significativa no experimento comparando bombas de infusão de diferentes fabricantes (P = 0,026). Embora o hematócrito, a hemoglobina total e o grau de hemólise tenham aumentado após a infusão, não foram identificadas variações estatisticamente significativas. Conclusões: o risco de hemólise induzido por bombas de infusão peristáltica linear foi identificado com base em um aumento nos marcadores de hemoglobina livre e potássio. Como o biomarcador potássio é frequentemente aumentado em concentrados de hemácias envelhecidos, não se recomenda usá-los nesse cenário e estudos adicionais podem ser realizados. Vale a pena realizar estudos sobre outros marcadores e utilizar amostras maiores para fundamentar a prática de enfermagem transfusional.

RESUMEN Objetivo: evaluar los biomarcadores de hemólisis de concentrados de glóbulos rojos transfundidos por dos bombas de infusión peristálticas lineales diferentes a dos velocidades de infusión. Método: se hizo un estudio experimental y aleatorizado que simula la práctica clínica de la transfusión. Se estudiaron dos bombas de infusión peristálticas lineales de diferentes fabricantes por triplicado a velocidades de infusión de 100 ml/h y 300 ml/h. Los biomarcadores de hemólisis elegidos fueron la hemoglobina total, la hemoglobina libre, el hematocrito, el potasio y el grado de hemólisis. Fueron analizados antes y después de cada infusión. Resultados: El potasio mostró variaciones estadísticamente significativas en todos los escenarios del experimento (P <0.010). En análisis separados, el potasio aumentó principalmente a una tasa de 300 ml/h (P=0.021) y la hemoglobina libre tuvo una variación significativa en un experimento de un fabricante de bomba de infusión (P=0.026). Aunque el hematocrito, la hemoglobina total y el grado de hemólisis aumentaron después de la infusión, no se identificaron variaciones estadísticamente significativas. Conclusiones: el riesgo de hemólisis inducido por una bomba de infusión peristáltica lineal se identificó por un aumento en la hemoglobina libre y los marcadores de potasio. Debido a que el biomarcador de potasio a menudo aumenta en los glóbulos rojos concentrados de edad, no recomendamos utilizarlos en este escenario y se podrían realizar estudios adicionales. Vale la pena realizar estudios sobre otros marcadores y el uso de muestras más grandes para fundamentar la práctica de enfermería de transfusión de sangre.

Determinación de hemólisis en cepas de Staphylococcus spp. causantes de mastitis bovina / Determination of hemolysis in Staphylococcus spp. strains which cause bovine mastitis / Determinação de hemólise em cepas de Staphylococcus spp. que causam mastite bovina

Introducción. El género Staphylococcus presenta una amplia diversidad de determinantes de virulencia que comprende componentes de la pared celular y exoproteínas, las cuales contribuyen a su habilidad para colonizar y causar enfermedad en los mamíferos; las hemolisinas, como las toxinas α,y las hemolisinas ß, Y y ô, son proteínas capaces de inducir lisis de eritrocitos y toxicidad en otras líneas celulares. Objetivo. Determinar la actividad hemolítica en cepas de Staphylococcus spp. causantes de infecciones intramamarias en vacas lecheras de fincas del cordón central lechero del departamento de Boyacá.Materiales y métodos. Se llevó a cabo un estudio cuantitativo, observacional y de corte transversal, en el cuál se determinó la hemólisis cualitativa y cuantitativa en 12 cepas de Staphylococcus spp. previamente confirmadas con ADN ribosómico 16S. Resultados. Se encontró actividad hemolítica positiva en 9 de las 12 cepas estudiadas; 6 presentaron hemólisis beta; 3, hemólisis alfa, y 3, hemólisis gamma o ausencia de hemólisis. La determinación cuantitativa se llevó a cabo en 9 cepas estudiadas, encontrándose aumento progresivo de la absorbancia y disminución del número de eritrocitos, a medida que aumentaba el tiempo de incubación.Conclusiones. La determinación cualitativa y cuantitativa de hemólisis en las cepas de Staphylococcus spp., permitió conocer la capacidad hemolítica presente en las cepas bacterianas aisladas de ubres de vacas con mastitis según el test de California en el departamento de Boyacá. Esto indica una implicación de riesgo patológico y epidemiológico en bovinos portadores de estas bacterias, por la posible transmisión a los consumidores de productos lácteos y sus derivados contaminados

Introduction:Staphylococcus gender presents a wide diversity of virulence types, which comprises components of the cell wall and exoproteins which contribute to its ability to colonize and cause disease in mammals. Hemolysins such as α toxins, ß, Y or ô are proteins capable to induce lysis de erythrocytes and toxicity in other cell lines. Objective: To determine the hemolytic activity in Staphylococcus spp. strains which cause intramammary infections in dairy cows from farms in the central milk producer area of Boyacá. Materials and methods: A quantitative study, observational and cross-sectional was carried out in which the determination of qualitative and quantitative hemolysis in 12 Staphylococcus spp. strains previously confirmed with 16S ribosomal DNA was done. Results: Positive hemolytic activity was found in 9 of the 12 strains; 6 beta hemolysis, 3 alpha hemolysis and 3 gamma hemolysis or no hemolysis. Nine strains in this study showed quantitative results, finding a progressive increase in absorbance and decrease in the number of red blood cell were found when the incubation time is increased. Conclusions: The qualitative and quantitative determination of hemolysis in Staphylococcus spp. strains showed the hemolytic capacity presented in isolated bacterial strains isolated from udders of cows with a positive California mastitis testin Boyacá. This indicates an implication of pathological and epidemiological risk in bovines which are carriers of these bacteria for the possible transmission to the consumers of dairy products which are contaminated.

Introdução. O gênero Staphylococcus possui uma ampla diversidade de determinantes de virulência que inclui componentes da parede celular e exoproteínas, que contribuem para sua capacidade de colonizar e causar doenças em mamíferos; hemolisinas, tais como toxinas α, e hemolisinas ß, Y e ô, são proteínas capazes de induzir lise eritrocitária e toxicidade em outras linhagens celulares.Objetivo. Determinar a atividade hemolítica em cepas de Staphylococcus spp. que causam infecções intramamárias em vacas leiteiras de fazendas leiteiras no departamento de Boyacá na Colômbia.Materiais e métodos. Foi realizado um estudo quantitativo, observacional e transversal, no qual a hemólise qualitativa e quantitativa foi determinada em 12 cepas de Staphylococcus spp. previamente confirmado com DNA ribossômico 16S. Resultados. Atividade hemolítica positiva foi encontrada em 9 das 12 cepas estudadas; 6 apresen-tavam hemólise beta; 3, hemólise alfa e 3, hemólise gama ou ausência de hemólise. A determinação quantitativa foi realizada em 9 cepas estudadas, encontrando um aumento progressivo na absorbân-cia e uma diminuição no número de eritrócitos na medida que o tempo de incubação aumentou.Conclusões. A determinação qualitativa e quantitativa da hemólise em cepas de Staphylococcus spp., permitiu conhecer a capacidade hemolítica presente nas cepas bacterianas isoladas de úberes de vacas com mastite segundo o teste da Califórnia no departamento de Boyacá. Isso indica uma impli-cação do risco patológico e epidemiológico em bovinos portadores dessas bactérias, devido à possível transmissão aos consumidores de produtos lácteos e seus derivados contaminados

Serogroup identification, phenotypic detection of hemolysis and extended spectrum beta-lactamases of Escherichia coli isolated from psittacine of illegal wildlife trade in Fortaleza, Brazil / Identificação de sorogrupo e detecção fenotípica de betalactamase de espectro estendido e produção de hemolisina em Escherichia coli isoladas de psitacídeos do tráfico de animais silvestres em Fortaleza-CE

This study aimed to identify serogroups of Escherichia coli important for human health in isolates from psittacine of illegal wildlife trade in Ceará State. In addition, hemolysis and production of Extended Spectrum Beta-Lactamases (ESBL) was assessed in the isolates. A total of 78 E. coli strains isolated from different Psittaciformes species from a wildlife rehabilitation center in Fortaleza, Brazil. The isolates used in this study were previously identified and stored. Serogroup identification was performed using polyvalent sera for EPEC (O55, O111, O119, O114, O125, O86, O126, O127, O128), EIEC (O136, O124) and EHEC (O157). ESBL detection was performed with double disk synergy method. For hemolysis detection, isolates were inoculated in blood agar base enriched with ovine blood. Only 31 (39.7%) isolates were seropositive and the most frequent were O127, O114, O128 and O111. There was no agglutination for serogroups O55, O124, O136 or O157. Considering both seropositive and seronegative isolates, 9 (11.5%) and 35 (44.9%) presented hemolysis and ESBL production, respectively. In conclusion, the investigated psittacine from illegal wildlife trade hosted ESBL-producing E. coli strains and some belong to important serogroups often linked to severe human infections.(AU)

Este trabalho teve como objetivo identificar sorogrupos de E. coli importantes para a saúde humana, oriundos de psitacídeos provenientes do tráfico no estado do Ceará, assim como detectar atividade hemolítica e produção de betalactamase de espectro estendido (ESBL). Foram testadas 78 cepas de Escherichia coli provenientes de psitaciformes do Centro de Triagem de Animais Silvestres, Fortaleza, CE. Para a identificação dos sorogrupos, utilizaram-se soros polivalentes EPEC (O55, O111, O119, O114, O125, O86, O126, O127, O128), EIEC (O136, O124) e EHEC (O157). Para detecção de ESBL, as cepas foram submetidas ao método de aproximação de disco e, para a detecção de hemolisina, foram plaqueadas em ágar sangue base enriquecido com sangue de carneiro. No geral, 31 (39,7%) das amostras foram soropositivas. Os sorogrupos mais frequentemente detectados foram O127, O114, O128 e O111. Não houve positividade para os sorogrupos O55, O124, O136 e O157. Considerando-se as amostras sororreagentes e não sororreagentes, observou-se que nove (11,5%) e 35 (44,9%) cepas de E. coli apresentaram produção de hemolisinas e de ESBL, respectivamente. Em conclusão, constatou-se que psitacídeos provenientes do tráfico de animais silvestres albergam cepas de E. coli produtoras de ESBL e providas de importantes sorogrupos implicados em graves infecções humanas.(AU)

Esferocitosis hereditaria: experiencia clínica y diagnóstica en Argentina / Hereditary spherocytosis: clinical and diagnostic experience in Argentina / Esferocitose hereditária: experiência clínica e diagnóstica na Argentina

Los objetivos del presente estudio fueron: a) Analizar las características demográficas y clínicas de nuestra población al diagnóstico; b) Evaluar si las pruebas más recientes presentan ventajas sobre las tradicionales; c) Confirmar la frecuencia de las distintas deficiencias de proteínas de membrana; d) Establecer la relación entre severidad y resultado de las pruebas o tipo de deficiencia. Se analizaron 359 individuos estudiados desde 2007, cuando se incorporaron criohemólisis hipertónica (CH), citometría de flujo con eosina-5'- maleimida (5'EMA-CF), FOE por citometría de flujo (FOE-CF) y electroforesis de proteínas de membrana (SDS-PAGE) al estudio de laboratorio clásico, fragilidad osmótica eritrocitaria (FOE) y autohemólisis (AH). Criterios diagnósticos para Esferocitosis Hereditaria (ESH): esferocitos en frotis y dos pruebas positivas. Se identificaron 174 pacientes con ESH y 22 portadores sanos. El 74,9% eran menores de 12 años. La transmisión fue dominante en el 83,1% de los casos. Tuvieron manifestaciones neonatales 89,1%. Las pruebas con mayor sensibilidad fueron CH (92,0%), FOE diferida (91,1%) y 5'EMA-CF (88,5%). En los 125 pacientes en quienes se realizaron CH, 5'EMA-CF y FOE-CF se observó que todos tenían al menos una prueba positiva; 122 (97,6%) tuvieron dos o tres positivas. Las deficiencias más frecuentes fueron ankirina y espectrina. No hubo diferencia en el resultado de las pruebas entre los subgrupos de severidad. Se concluye que las deficiencias más frecuentes en Argentina son ankirina y espectrina, coincidiendo con otras poblaciones latinoamericanas. El uso simultáneo de CH, 5'EMA-CF y FOE-CF permite diagnosticar más del 97% de los casos. La incidencia de manifestaciones neonatales es elevada.

The aims of this study were (a) to assess demographic and clinical aspects of our population at diagnosis; (b) to evaluate diagnostic accuracy of hypertonic cryohemolysis (HC), eosin-5'-maleimide flow cytometry (EMA-FC) and flow cytometric osmotic fragility (OF-FC) in relation to standard screening tests osmotic fragility (OF) and autohemolysis (AH); (c) to confirm the previously reported prevalence of membrane proteins defects; and (d) to assess the relationship between severity of anemia and results of confirmatory tests. Since 2007, the following tests were available in our laboratory: OF, AH, HC, EMA-FC, OF-FC and SDS-PAGE of membrane proteins. Diagnostic criteria for hereditary spherocytosis were spherocytes in blood smear plus ≥2 positive tests. Data from 359 individuals were analyzed: 174 HS patients and 22 silent carriers were detected; 74.9% of patients were less than 12 years old; 83.1% of them showed a dominant inheritance pattern; antecedent of neonatal jaundice/anemia was registered in 89.1%. Tests with higher sensitivity were: HC (92.0%), incubated OF (91.1%), and EMA-FC (88.5%). HC, EMA-FC and OF-FC were simultaneously performed on 125 patients: each of them had at least 1 positive test; 122 (97.6%) had 2 or 3 positive tests. Ankyrin and spectrin were the most frequently found protein deficiencies. Comparison of test results in relation to severity of anemia showed no difference between groups. It can be concluded that compared toother Latin American countries, ankyrin and spectrin were the most frequent protein deficiencies. Simultaneous performing of HC, EMA-FC and OF-FC enabled diagnosing HS in more than 97% of patients. A high incidence of neonatal jaundice/anemia was observed.

Os objetivos do presente estudo foram: a) analisar as características demográficas e clínicas de nossa população ao diagnóstico; b) Avaliar se as provas mais recentes apresentam vantagens sobre as tradicionais; c) Confirmar a frequência das diversas deficiências de proteínas de membrana; d) Establecer a relação entre severidade e resultado das provas ou tipo de deficiência. Foram analisados 359 indivíduos estudados desde 2007, quando se incorporaram crio-hemólise hipertônica (CH), citometria de fluxo com eosina-5'-maleimida (5'EMA-CF), FOE por citometria de fluxo (FOE-CF) e eletroforese de proteínas de membrana (SDS-PAGE) ao estudo de laboratório clássico - fragilidade osmótica eritrocitária (FOE) e auto-hemólise (AH). Critérios diagnósticos para ESH: esferócitos em esfregaço e duas provas positivas. Foram identificados 174 pacientes com ESH e 22 portadores sadios. 74,9% eram menores de 12 anos. A transmissão foi dominante em 83,1%. Tiveram manifestações neonatais 89,1%. As provas com maior sensibilidade foram CH (92,0%), FOE diferida (91,1%) e 5'EMA-CF (88,5%). Nos 125 pacientes aos quais lhes realizaram CH, 5'EMA-CF e FOE-CF se observou que todos tinham no mínimo uma prova positiva; 122 (97,6%) tiveram duas ou três positivas. As deficiências mais frequentes foram anquirina e espectrina. Não houve diferença no resultado das provas entre os subgrupos de severidade. Conclui-se que as deficiências mais frequentes na Argentina são anquirina e espectrina, as quais coincidem com outras populações latinoamericanas. O uso simultâneo de CH, 5'EMA-CF e FOE-CF permite diagnosticar mais de 97% dos casos. A incidência de manifestações neonatais é elevada.

Doppler velocimetry of the orbital arteries in patients with sickle cell anemia: relationship with biomarkers of hemolysis / Dopplervelocimetria arterial das órbitas em portadores de anemia falciforme: relação com biomarcadores de hemólise

Abstract Objective: To investigate orbital vascular resistance by Doppler velocimetry in patients with steady-state sickle cell anemia, as well as to characterize its relationship with biomarkers of hemolysis. Materials and Methods: This was a cross-sectional study of two groups: 71 outpatients with sickle cell anemia; and 32 age- and gender- matched, healthy subjects (control group). All participants underwent Doppler velocimetry of the orbital arteries and laboratory tests. Results: All biochemical laboratory markers were abnormal in the sickle cell anemia patients (p < 0.0001 vs. controls). In the patient group, Doppler velocimetry revealed increased flow velocities in the ophthalmic artery and reduced flow velocities in the central retinal artery, as well as high values for the resistance index (RI) and pulsatility index (PI) in both arteries (p < 0.0001 vs. controls). Biomarkers of hemolysis were found to correlate significantly with the RI and PI indices. In the ophthalmic artery, the reticulocyte count showed a moderate direct correlation with RI and with PI. In the central retinal artery, hemoglobin showed a strong inverse correlation with RI and with PI. Conclusion: Orbital vascular resistance, as evaluated by Doppler velocimetry, is elevated in patients with steady-state sickle cell anemia and shows a significant correlation with biomarkers of hemolysis.

Resumo Objetivo: Investigar o estado de resistência vascular arterial orbitária por meio de dopplervelocimetria em portadores de anemia falciforme e sua relação com biomarcadores de hemólise. Materiais e Métodos: Dois grupos foram examinados neste estudo transversal: um grupo composto de 71 pacientes portadores de anemia falciforme, e o outro grupo, controle, formado por 32 sujeitos saudáveis, pareados por gênero e idade. Todos os participantes foram avaliados por meio de ultrassonografia Doppler das órbitas e de testes laboratoriais. Resultados: Todos os marcadores laboratoriais foram anormais nos portadores de anemia falciforme em comparação aos controles (p < 0,0001). A avaliação dopplervelocimétrica mostrou velocidades aumentadas na artéria oftálmica e reduzidas na artéria central da retina, bem como índices de resistência (IR) e de pulsatilidade (IP) vascular elevados em ambas as artérias no grupo anemia falciforme em relação ao grupo controle (p < 0,0001). A análise da relação entre os marcadores de hemólise e os índices IR e IP mostrou associação significativa, com moderada correlação direta entre reticulócitos e IR e IP na artéria oftálmica e forte correlação inversa entre hemoglobina e IR e IP na artéria central da retina. Conclusão: A resistência vascular arterial das órbitas, aferida por meio de dopplervelocimetria, é elevada em portadores de anemia falciforme, com moderada a forte correlação com os biomarcadores de hemólise.

Estudio de la interferencia por hemólisis en la determinación de bilirrubina total / Hemolysis interference study in determination of total bilirubin / Estudo da interferência por hemólise na determinação de bilirrubina total

La hemólisis es una causa frecuente de rechazo de muestras que genera un sesgo negativo en la determinación de bilirrubina total (BT). Los objetivos de este trabajo fueron determinar el grado de hemólisis (GH) para reemplazar la inspección visual subjetiva, establecer la magnitud de su interferencia y conocer la concentración inicial de hemoglobina a partir de la cual se produce interferencia clínicamente relevante (ICR). Se recolectaron sueros con diferentes concentraciones de BT. Se preparó un hemolizado para generar distintas concentraciones de interferente. Se cuantificó la BT mediante el método de diclorofenildiazonio en los sueros con las diferentes concentraciones de hemoglobina y se determinó GH midiendo absorbancia a 578 nm. Se consideró ICR cuando se superó la máxima inexactitud deseable. Para cada nivel de BT se determinó la concentración de hemoglobina máxima aceptable (CHbmáx aceptable) por sobre la cual se considera ICR. La Abs578 permitió definir cuatro GH (GH1, GH2, GH3 y GH4). A partir de los interferogramas se determinó la CHbmáx aceptable para cada nivel de BT; ésta mostró un aumento lineal con la BT. A partir de 14,8 mg/dL de BT no se encontró ICR en los rangos estudiados. El GH permite tomar conductas objetivas ante muestras hemolizadas según el algoritmo propuesto.

Hemolysis is a common cause for rejection of samples that generates a negative bias in total bilirubin (TB) determination. The objectives of this study were to determine the hemolysis degree (HD) to replace the subjective visual inspection, to establish the extent of their interference and to meet the initial hemoglobin concentration from which clinically relevant interference (CRI) occurs. Sera was collected at different TB concentrations.Hemolysate was prepared to generate different concentrations of interfering. TB was quantified by dichlorophenyldiazonium method in sera with several hemoglobin concentrations, and DH was determined by measuring absorbance at 578 nm (Abs578). CRI was considered when it exceeded the maximum desirable inaccuracy. For each TB level, the maximum acceptable concentration of hemoglobin (CHbmáx acceptable) above which ICR is considered was determined.The Abs578 made it possible to define four DH (DH1, DH2, DH3 and DH4). The CHbmax acceptable was determined for each level of TB from the interferograms; it showed a linear increase with TB. From 14,8 mg/dL BT, CRI was not found in the ranges studied. The DH makes it possible to have objective behaviours in hemolyzed samples according to the proposed algorithm.

A hemólise é uma causa frequente de rejeição de amostras que gera um viés negativo na determinação da bilirrubina total (BT). Os objetivos deste estudo foram: determinar o grau de hemólise (GH) para substituir a inspeção visual subjetiva, estabelecer a extensão da sua interferência e conhecer a concentração inicial de hemoglobina a partir da qual ocorre a interferência clinicamente relevante (ICR). Foram coletados soros com diferentes concentrações de BT. Um hemolisado foi preparado para gerar diferentes concentrações de interferente. Foi quantificada a BT pelo método de diclorofenil diazônio nos soros com as diferentes concentrações de hemoglobina e foi determinado o GH medindo a absorvância a 578 nm (Abs578). ICR foi considerada quando se superou a máxima inexatidão desejável. Para cada nível de BT foi determinada a concentração de hemoglobina máxima aceitável (CHbMax aceitável) acima da qual é considerada ICR. A Abs578 permitiu definir quatro GH (GH1, GH2, GH3 e GH4). A partir dos interferogramas se determinou a CHbMax aceitável para cada nível de BT; ela apresentou um aumento linear com a BT. A partir de 14,8 mg/dL de BT, a ICR não foi encontrada nos intervalos estudados. O GH permite ter condutas objetivas diante de amostras hemolisadas de acordo com o algoritmo proposto.

Infusion pumps and red blood cell damage in transfusion therapy: an integrative revision of the academic literature / Bombas de infusão e lesão celular em hemácias na terapia transfusional: revisão integrativa da literatura / Bombas de infusión y lesión celular en glóbulos rojos en la terapia transfusional: revisión integradora de la literatura

ABSTRACT Objectives: to obtain information from scientific literature concerning infusion pumps used in administering erythrocyte (red blood cells) and to evaluate the implications in the practical use of this equipment by nurses when conducting transfusions. Method: an integrative revision of the following scientific databases: Pubmed/Medline, Scopus, the Virtual Library for Health, SciELO, Web of Science and Cochrane. The following descriptors were used: "infusion pumps", "blood transfusion", "transfused erythrocyte" and "hemolyis". There were no restrictions on the scope of the initial data and it was finalized in December 2014. 17 articles were identified in accordance with the inclusion and exclusion criteria. Results: all of the publications included in the studies were experimental in vitro and covered the use of infusion pumps in transfusion therapy. A summary of the data was presented in a synoptic chart and an analysis of it generated the following categories: cellular damage and the infusion mechanism. Conclusion: infusion pumps can be harmful to erythrocytes based on the infusion mechanism that is used, as the linear peristaltic pump is more likely to cause hemolysis. Cellular damage is related to the plasmatic liberation of markers that largely dominate free hemoglobin and potassium. We reiterate the need for further research and technological investments to guide the development of protocols that promote safe practices and that can contribute to future clinical studies.

RESUMO Objetivos: identificar na literatura a produção científica acerca dos efeitos de bomba de infusão na administração de hemácias e avaliar as implicações do uso desses equipamentos na prática transfusional de enfermagem. Método: revisão integrativa de literatura nas bases de dados Pubmed/Medline, Scopus, Biblioteca Virtual em Saúde, SciELO, Web of Science e Cochrane, utilizando os descritores "bombas de infusão", "transfusão de sangue", "transfusão de eritrócitos" e "hemólise". A data inicial não foi delimitada e a final foi dezembro de 2014. Foram identificados 17 artigos de acordo com os critérios de inclusão e exclusão. Resultados: Todas as publicações incluídas eram estudos experimentais in vitro e abordavam o uso de bombas de infusão na terapêutica transfusional. A síntese dos dados foi apresentada em quadro sinóptico e a análise gerou duas categorias relevantes: lesão celular e mecanismo de infusão. Conclusão: bombas de infusão podem ser deletérias às hemácias de acordo o mecanismo de infusão, sendo que as peristálticas lineares foram mais predisponentes à hemólise. A lesão celular foi relacionada à liberação plasmática de marcadores, predominando a hemoglobina livre e potássio. Reitera-se a necessidade de pesquisas adicionais e investimentos tecnológicos para nortear o desenvolvimento de protocolos que promovam prática segura e que subsidiem futuros estudos clínicos.

RESUMEN Objetivos: identificar en la literatura la producción científica acerca de los efectos de la bomba de transfusión en la administración de glóbulos rojos y evaluar las implicaciones del uso de esos equipos en la práctica transfusional de enfermería. Método: revisión integradora de literatura en las bases de datos Pubmed/Medline, Scopus, Biblioteca Virtual en Salud, SciELO, Web of Science y Cochrane, utilizando los descriptores "bombas de infusión", "transfusión de sangre", "transfusión de eritrocitos" y "hemolisis". La fecha inicial no fue delimitada y la final fue en diciembre de 2014. Fueron identificados 17 artículos de acuerdo con los criterios de inclusión y exclusión. Resultados: todas las publicaciones incluidas eran estudios experimentales in vitro y abordaban el uso de bombas de infusión en la terapéutica transfusional. La síntesis de los datos se presenta en un cuadro sinóptico y el análisis generó dos categorías relevantes: lesión celular y mecanismo de transfusión. Conclusión: las bombas de infusión pueden ser perjudiciales para los glóbulos rojos de acuerdo el mecanismo de transfusión, siendo que las peristálticas lineares fueron más predisponentes para la hemolisis. La lesión celular fue relacionada a la liberación plasmática de marcadores, predominando la hemoglobina libre y el potasio. Se reitera la necesidad de realizar investigaciones adicionales e inversiones tecnológicas que puedan orientar el desarrollo de protocolos que promuevan la práctica segura y que ayuden a futuros estudios clínicos.

Relação entre polimorfismos do gene BCL11A e biomarcadores de hemólise em pacientes com anemia falciforme

A anemia falciforme (AF) é uma doença hematológica causada por uma mutação pontual no gene da β-globina. A hemoglobina S (HbS) gerada devido à mutação forma hemácias com menor meia-vida devido à sua destruição crônica, sendo a principal responsável pelos sinais e sintomas da doença. Os polimorfismos do gene BLC11Ae o uso de hidroxiuréia (HU)modulam a concentração de hemoglobina fetal (HbF), principal inibidora da polimerização da HbS, diminuindo a hemólise e a vaso-oclusão. O presente estudo teve o objetivo de associar os polimorfismos do gene BCL11Acom os biomarcadores de hemólise reticulócitos, bilirrubinas, ácido úrico, lactato desidrogenase (LDH),e metemoglobina (MetHb). Participaram do estudo 45pacientes com AF em uso de HU, de ambos os sexos, atendidos no ambulatório de Hematologia do Hospital Universitário Walter Cantídio (HUWC) em Fortaleza-Cearáe 80indivíduos saudáveis como grupo controle. A dosagem de MetHb, de ácido úrico e bilirrubinas foi realizada através de método espectrofotométrico, a de LDH por método cinético, a contagem de reticulócitos por metodologia manual e a avaliação dos polimorfismos do BCL11Apor PCR em tempo real. Os dados obtidos foram analisados utilizando-se o programa estatístico GraphPad Prism...

Sickle cell disease (SCD) is a hematological disease caused by a point mutation in the β-globin gene. Sickle hemoglobin (HbS) is generateddue to fragile mutation that decreases the red blood cell lifetime due to its chronic destruction, being the main responsible for the signs and symptoms of the disease.The use of hydroxyurea (HU) and genetic polymorphisms on modulates fetal hemoglobin (HbF), the main inhibitor of HbS polymerization, reducing hemolysis and vaso-occlusion.This study aimed to evaluate the association of polymorphisms BCL11 Agene on the hemolysis markers reticulocytes, bilirubin, uric acid, lactate dehydrogenase (LDH) and methemoglobin (MetHb). The study included 45 patients with SCD of both sexes, in use of HU, attendedin outpatient University Hospital Walter Cantídio (HUWC) in Fortaleza, Ceará, and 80 healthy individuals as a control group. The MetHb, uric acid and bilirubin dosage has performed by spectrophotometric method, the LDH by a kinetic method, the reticulocyte count by manual method and evaluation of BCL11A polymorphisms by PCR in real time. Data were analyzedusing the statistical software GraphPad Prism...

Hemólise de eritrócitos em dispositivos de infusão intravenosa: revisão integrativa da literatura / Hemolysis of erythrocytes in intravenous infusion devices: An integrative review of the literature / Hemolisis de eritrocitos en dispositivos de infusión: revisión integrativa de la literatura

Hemólise extracorpórea pode ser identificada durante processos hemoterápicos. O enfermeiro é um dos profissionais responsáveis pela administração de hemocomponentes e controle de possíveis riscos, portanto deve apropriar-se de conhecimentos que respaldem a prática clínica. O objetivo foi identificar na literatura aspectos relacionados à hemólise em concentrados de hemácias decorrentes de administração de sangue por dispositivos de infusão intravenosa. Realizou-se Revisão Integrativa da Literatura. Incluídos artigos na língua inglesa, espanhola e portuguesa, sem delimitação da data, indexados em quatro bases de dados. Foram selecionadas 12 (100,0%) produções científicas, sendo que em sete (58,3%) foram analisadas bombas de infusão, em duas (16,7%) a manipulação de eritrócitos, em duas (16,7%) a hemólise com combinações de dispositivos e em uma (8,3%) cateter intravenoso. Os resultados de quatro (33,3%) destes estudos evidenciaram ocorrência de hemólise. Os estudos apontaram que pode ocorrer hemólise durante a passagem do componente por bombas de infusão e cateteres (AU).

Extracorporeal hemolysis may be identified during hemotherapy. The nurse is one of the professionals responsible for the administration of blood components and the control of possible risks, and must therefore acquire the knowledge which supports clinical practice. The objective was to identify, in the literature, aspects related to hemolysis in concentrates of red blood cells resulting from the administration of blood through intravenous infusion devices. An Integrative Review of the Literature was undertaken, including articles in the English, Spanish and Portuguese languages, without limitation of data, indexed in four databases. A total of 12 (100.0%) scientific productions were selected, of which seven (58.3%) analyzed infusion pumps, two (16.7%) the handling of erythrocytes, two (16.7%) hemolysis with combinations of devices, and one (8.3%), the intravenous catheter. The results of four (33.3%) of these studies evidenced the occurrence of hemolysis. The studies indicated that hemolysis can occur during the passage of the component through infusion pumps and catheters (AU).

Hemolisis extracorpórea puede ser identificada durante procesos hemoterápicos. El enfermero es uno de los profesionales responsables por la administración de hemocomponentes y control de posibles riesgos, por lo tanto debe apropriarse de conocimientos para garantizar la práctica clínica. El objetivo fue identificar en la literatura aspectos de la hemolisis en concentrados de hematíes decurrentes de administración de sangre por dispositivos de infusión intravenosa. Fue realizada revisión integrativa de la literatura. Se utilizaron artículos en lengua inglesa, española y portuguesa, sin delimitación de fecha, indexados en cuatro bases de datos. Fueron seleccionadas 12 (100,0%) producciones científicas, siendo que en siete (58,3%) fueron analizadas bombas de infusión, en dos (16,7%) la manipulación de eritrocitos, en dos (16,7%) la hemolisis con combinaciones de dispositivos y en una (8,3%) catéter intravenoso. Los resultados de cuatro (33,3%) de estos estudios evidenciaron ocurrencia de hemolisis. Los estudios apuntaron que puede ocurrir hemolisis durante la pasaje del componente por bombas de infusión y catéteres (AU).

Hipertensão pulmonar associada à anemia falciforme / Sickle cell disease-associated pulmonary hypertension

A hipertensão pulmonar é uma complicação comum em pacientes com anemia falciforme. A despeito das elevações leves das pressões pulmonares, a morbimortalidade desses pacientes é alta e a hipertensão pulmonar é um fator de risco muito importante nestes pacientes. A patogênese da hipertensão pulmonar relacionada à anemia falciforme é multifatorial e inclui a hemólise, baixos níveis de óxido nítrico, hipóxia crônica, tromboembolismo, doença hepática crônica e asplenia. Na maioria dos pacientes, hipertensão arterial pulmonar é a causa principal para elevações na pressão arterial pulmonar, mas hipertensão pulmonar venosa também é um fator contribuinte em alguns pacientes. Existem poucos estudos específicos avaliando os efeitos de tratamento para a hipertensão pulmonar em pacientes com anemia falciforme. É provável que a intensificação da terapia para a anemia hemolítica em todos os pacientes e tratamento específico para a hipertensão pulmonar em pacientes com hipertensão pulmonar severa seja benéfica...

Pulmonary hypertension is a common complication of sickle cell disease. In spite of the mild elevations in pulmonary artery pressures in these patients, morbidity and mortality is high and in adult patients with sickle cell disease, pulmonary hypertension is emerging as a major risk factor for death. The pathogenesis of pulmonary hypertension is likely multifactorial, including hemolysis, impaired nitric oxide bioavailability, chronic hypoxemia, thromboembolism, chronic liver disease and asplenia. In the majority of patients with sickle cell disease, pulmonary arterial hypertension is the cause of elevated pulmonary artery pressures, but also that pulmonary venous hypertension does contribute to pulmonary hypertension in a subgroup of patients. There are currently limited specific data on the effects of any treatment modality for pulmonary hypertension in patients with sickle cell disease. It is likely that maximization of sickle cell disease therapy, in all patients, and treatment with selective pulmonary vasodilators and antiproliferative agents, in patients with severe disease, would be beneficial...